州疾控中心实验室检验检测能力提升项目

恩施州疾病预防控制中心州疾控中心实验室检验检测能力提升项目，拟申请采购进口产品，现将有关专家论证意见进行公示。

一、项目名称

州疾控中心实验室检验检测能力提升项目

二、拟采购进口产品的名称、数量、具体技术指标、功能需求及预算

采购内容：高通量测序系统，便携式高通量测序系统，长读长三代纳米孔测序系统，全自动化建库工作站，梯度PCR仪，核酸蛋白荧光定量仪，甩板离心机，液相色谱-四极杆串联飞行时间高分辨质谱联用仪，全自动顶空进样器各一套。
具体参数与功能：（1）高通量测序系统、便携式高通量测序系统：核酸起始量要求：≤1ng；具备超快速分析方案，以用于各种基因组分析解决方案；高数据通量：每次反应可生成≥280G亿碱基数据；单端读取序列，读长≥150个碱基；可精确读取≥12个的连续单个重复碱基；
（2）长读长三代纳米孔测序系统：起始样品量：10pg-5ug；测序样品上样量：≥100ng，或≥75ul；测序通道数量：512测序芯片槽或216测序芯片槽；测序速度：≥450bp/s（DNA）、≥70bp/s（RNA）；具备DNA/RNA直接测序，RNA无需转换成cDNA即可进行测序；
（3）全自动化建库工作站：可对采血管，板类耗材实现1D 及2D 条码扫描。每32个样本扫描时间≤10秒；单批次自动化扫描≥2000份样本；配备8个独立的移液通道，移液范围0.5-1000ul；独立8通道移液范围：最高可达1000ul，最小为0.5ul；独立8通道移液精度：吸取1000ul液体时，精度CV值≤0.75%；配备96头移液单元，移液范围1-1000ul；96通道分液头移液范围：1-1000ul；工作站可捕获并处理错误。
（4）梯度PCR仪：银质样品模块，适用 0.1ml/0.2ml PCR 管、8 联管及 96 孔PCR 板；升温 10 ℃/秒，降温 5 ℃/秒 ；温控精确度：±0.15 ℃；温度均一性：20-72 ℃时 ≤±0.2 ℃；95℃时 ≤±0.3 ℃；2D-梯度技术，可以生成横向（12列）和纵向（8排）温度梯度；温控模块6块半导体元件均独立控制；
（5）核酸蛋白荧光定量仪：处理时间：≤3秒/样品；动态范围：4个数量级；光源：蓝光LED(最大460–480nm), 红光LED (最大620–640 nm)；激发通道：蓝光456–484 nm；红光612–644 nm；发射通道：绿光513–563nm；远红光671–693nm；测量范围320-1,100 nm；
（6）甩板离心机：最大容量：48 × 1.5/2.0 mL离心管，16 × 5.0 mL锥形管，6 × 50 mL锥形管；最大相对离心力：大于30,000 × g；12款不同转子可选择；可存储50个常用程序；自动转子识别和自动转子失衡检测；ECO 自动待机功能，8 小时无使用后自动关机；转子和附件可高温高压灭菌 (121 ℃, 20 分钟) ，保护操作人员安全 。
（7）液相色谱-四极杆串联飞行时间高分辨质谱联用仪：二元高压梯度泵： 压力范围≥15000psi；流速范围：0.001～2mL/min，步进≤0.001 mL/min；流速准确度≤±1%；速精密度≤0.075%RSD；梯度组成比例精密度：≤0.15%RSD。温度控制范围：4℃～40℃；进样量范围：0.1μL～20μL，步进0.1μL；样品容量≥90个2mL样品瓶位；进样精度≤0.25%RSD；样品残留：≤0.004%；耐压上限≥15000psi柱温箱；控温准确度≤±0.5℃；控温精确度≤±0.3℃。质量数范围：四级杆 m/z 50-4,000；TOF m/z 50-40,000。配置ESI电喷雾离子源/ APCI大气压化学离子源（或ESI/APCI复合离子源）。内置全自动注射泵并自带至少3路进样瓶。质量精确度：MS及MS/MS模式达到<1 ppm。升温速度：ESI及APCI模式下630℃≤60秒。检测器：采样频率>3GHz。扫描功能：全扫描、子离子扫描、母离子扫描、中性丢失扫描(Neutral Loss Scan)、高分辨MRM定量扫描等； 自动时间编程功能：多化合物同时监测时，根据保留时间和峰宽自动分配每个离子驻留时间。真空系统：大抽速机械泵和长寿命涡轮分子泵组合差分抽气高真空系统，有自动断电保护功能。
（8）全自动顶空进样器：全惰性进样通道；电子气路控制(EPC)控制，进样压力0~50psi，精度≤0.001psi；不低于10位样品瓶托盘，适合10mL，20mL样品瓶；控温范围：室温以上5℃ 至 210℃，1℃增量；加热时间：0-999.990min，0.001min增量；进样模式：压力顶空模式，非气密性进样针方式，具有单次提取，多次提取，浓缩提取功能。面积重复性<1% RSD；样品环/阀工作温度：35℃到210℃。

三、申请采购进口产品的理由、政策依据

（1）高通量测序系统、便携式高通量测序系统、长读长三代纳米孔测序系统：针对新冠等高致病微生物导致的疫情进行溯源是疫情处置的关键措施，及时发现和检测病原基因变异能有效预测评估传染病风险，同时为完成国家、省下达的突发公共卫生事件、急性传染病的防控工作任务，此套设备是必不可少的关键设备。
（2）全自动化建库工作站：在文库制备的工作中，对于液体的移液精度要求非常高，1ul的CV要求低于6%，国产工作站只能进行一些大体积的移液，小体积移液CV值远远大于6%，对于实验结果影响很大。
在文库制备过程中，样本的体积不是一致的，而且样本类型也不尽相同，需要工作站同时具有电容发和压力法液面探测功能，国产设备只能实现简单的电容法探测，不能实现压力法探测。进口产品的96移液通道同样可以独立进行液面探测，并且移液范围1-1000ul。而国产的96移液通道无液面探测功能，无法满足实验检测需要。
（3）梯度PCR仪：是病原基因测序流程中一的个关键设备，是配合一系列测序设备发挥其功用的设备，要求采用银质模块，可快速精确控温，具备样品温控保护技术，减少非特异性反应，具备多种温控模式，以适应不同类型的样品。
（4）核酸蛋白荧光定量仪：用于核酸和蛋白的精确定量分析，是我州分子生物学习重点实验室的一项重点工作内容，也是此次加强疾控工作体系检测能力的重点方向。
（5）甩板离心机：要求从零加速至最高转速时间和从最高转速减速至零过程在短时间内完成，具有可计时(秒为单位)瞬间离心系统，离心机自带不平衡检知系统，定速计时功能，精准确定离心时间。是测序过程的关键辅助设备。
（6）液相色谱-四极杆串联飞行时间高分辨质谱联用仪：四极杆串联飞行时间质谱仪在进行全扫描的同时支持得到高分辨率的二级质谱图，可以在不增加工作量的同时，完成定性工作的进一步确证，而且同时支持精确质量数，同位素丰度比，保留时间，以及二级质谱谱库四大确证要点。这些特定的未知物筛查工作流程在这种常规针对各国法律法规要求的未知物筛查鉴定处理中都可大大提高检测的响应速度，并且提高准确性。
四极杆串联飞行时间质谱仪是建立在QQQ基础上的高分辨分析平台，它支持所有QQQ的扫描模式，比如：母离子扫描，中性丢失扫描，而且是精确质量数的中性丢失扫描，同时它不仅支持这些扫描模式，还支持通过这种中性丢失扫描模式来触发二级质谱收集的工作流程，这就保证了即使在复杂基质中也能获得高质量的 MS/MS质谱图。
（7）全自动顶空进样器：此设备的顶空精度、炉温要求很高，由于其检测原理要求进校相对误差要求达到极小的程度，且温度的精确性、稳定性都对检测结果有极大影响，故需要采购高精准设备。我单位在化学性中毒如职业场所、不源性突发公共卫生事件中均必须使用此设备。

四、专家论证的意见

（1）高通量测序系统、便携式高通量测序系统、长读长三代纳米孔测序配套系统主要用于人类、动物、微生物等生物DNA、RNA测序及系统生物学测试及研究用，可从临床标本中直接分析新冠病毒的基因组序列，具备对新冠病毒基因组序列的拼接、对比、进化同源分析；同时具备针对不明原因肺炎、不明原因感染、不明原因发热等标本的基因组分析功能和对生物性水污染、食物中毒、突发和新发公共卫生事件的快速检测功能。拟购该配套设备应具备高通量的基本要求，同时要求测序准确度高，无误差或误差极小，速度快等特点。
目前国产设备的通量要求、准确性、快速性等方面还有差距，国内外产品的精度、稳定性相差较大，检测时长也不一样，国产设备暂无法满足应用要求。特别是目前新冠疫情下要求大批量、高速度的样本检测，国内各检测机构基本采用进口相关设备进行检测，考虑到现有的疫情和实际工作需要建议使用进口产品。
（2）全自动化建库工作站：拟采购进口设备全自动化建库工作站主要用于NGS文库制备，能够在短时间内建立DNA基因库，用于基因克隆及基因编辑等高精尖生物技术，同时要求样品制备兼具电容法和压力法液面探测，避免加样错误和样交叉污染，保护操作者健康。
此设备要求工作效率高，准确性好，以保证检测质量，同时对移液精度要求非常高，1μL的CV要求低于6%，在微量化检测中加样精准、重复性好、加样范围宽等特点。而目前国产设备移液精度无法满足要求，且仅有电容法的样品制备法，无法满足实际检测需要。为确保移液高精度、提高检测能力，建议购买进口设备。
（3）梯度PCR仪：拟采购的进口设备梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪，为二代测序前建库过程中的核酸片段扩增常用设备，主要用于微量或极微量样品进行基因片段扩增，达到提取基因克隆获取目的基因的目的，通过设置一系列不同温度的退火条件，一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的最适合退火温度进行高效的扩增。
该设备对测序片段的完整性等方面要求高，且要求扩增快速、控温精准，以达到节省实验时间、提高实验效率、节约实验成本的目的。国产设备在保持测序完整性、控温准确性、稳定性等方面存在差距，且灵敏度较低、假阳性率高及非特异性产物多，建议采购进口设备。
（4）拟采购进口设备核酸蛋白荧光定量仪集微量单、双链DNA、微量RNA、微量micro RNA、微量蛋白及RNA完整性质量等多功能于一体的设备，每个样品测量时间不超过5秒，控温精度≤0.15℃并能保持一致，才可满足PCR及免疫印迹实验要求。
目前国内同类设备检测时长、控温精度、设备的多功能性等不能满足恩施州疾控中心对多样本、复杂样本的检测要求，因此建议采购进口设备。
（5）甩板离心机：拟采购进口设备甩板离心机对控温稳定性、准确性要求高，要求在极短时间内采取全自动操作达到离心后无残留，净化效果好且无交叉污染，自带不平衡检知系统，是测序关键配套设备。而国内相应设备控制能力较差，可能影响到后期结果，为了保证测序的准确性，建议购置与测序仪相配套的进口设备。
（6）液相色谱-四级杆串联飞行时间高分辨质谱联用仪：拟采购的液相色谱-四级杆串联飞行时间高分辨质谱联用仪通过超高效液相色谱仪分离有机物，进入质谱仪电离，检测一级母离子的精确质量数；或经过一级四级杆选择母离子，第二级碰撞池打碎，第三级飞行时间管检测二级离子的精确质量数。
该设备主要用于食品安全领域未知化合物的定性定量确证及代谢组学研究，在药物分析、生物大分子领域具有强大优势，特别是在未知物的筛查方面表现出色。该设备在检出限、灵敏度等方面要求超高，工作性能稳定、检测速度快，能在短时间内检测出较多样品。有利于州疾控中心在非法添加、快速筛查、药物分析、锁定目标物等方面提升工作质量。而目前国产设备在检出限、灵敏度及工作稳定性方面均无法满足工作要求，建议采购进口相关设备。
（7）全自动顶空进样器：该设备能实现自动运行、连续进样，最大程度的提高工作效率，关键控制参数为进样压力精度高，面积重复性＜1%RSD，以保证检测结果的准确度，气固、气液平衡快速、稳定，进样相对误差小。
拟购进的该进口设备为中心现有设备的配套设备，能保持设备使用一致性。国内同类产品平衡时间较长、进样误差较大难以满足高精度、高准确度的检测要求，同时国内产品在仪器的连接匹配度、软件控制稳定性等方面均存在差距，建议采购能与进口设备相匹配的进口设备。
以上9台套设备均不属于《中国禁止进口限制产品目录》中限制进口产品，建议根据检测性质及结果准确性、及时性等需求，采购进口设备。

五、专家名单

姓名 职称、职务 工作单位
胡卫兵 二级教授、主任 湖北民大物理化学
罗洪斌 教授、学科办副主任 湖北民大生物化学与分子生物学
谢义梅 高级工程师、食品所所长 恩施州公共检验检测中心
邹 毅 副主任技师、主任 恩施州中心医院医学实验中心
马继学 律师 图盛律师

六、公告期限（五个工作日）

2020年09月29日至2020年10月12日

供应商若在公示期间对专家组论证意见持有异议，请将相关意见以书面形式提交至采购人。

七、联系方式

采购人：恩施州疾病预防控制中心

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采购监管机构：恩施州财政局

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