桂枝茯苓丸逆转雌二醇介导的H19/miR-195-5p/SGK1通路治疗子宫内膜癌的机制研究

招标项目名称：桂枝茯苓丸逆转雌二醇介导的H19/miR-195-5p/SGK1通路治疗子宫内膜癌的机制研究

招标部门：科教科   时间：2020.4
联系人：何老师     联系电话***

一、招标项目基本情况

服务项目：

（一）研究内容
     1.构建H19野生型及突变型表达载体，将其与miR-195-5p细胞共转染，双荧光素酶报告基因实验检测其与miR-195-5p的结合及结合位点，CHIP验证 H19 与 miR-195-5p的互作关系；通过生物信息学软件TargetScan确定miR-195-5p与SGK1启动子的潜在结合序列，构建SGK1野生型与突变型双荧光素酶报告基因载体，将其与miR-195-5p的agomir及antagomir进行细胞共转染，检测SGK1与miR-195-5p互作关系及互作位点；构建H19/SGK1过表达及敲低的稳转子宫内膜癌 Ishikawa细胞系,进行miR-195-5p和E2水平干预，检测H19、miR-195-5p水平和SGK1表达改变。

2.不同浓度含药培养液处理细胞，放射性免疫法检测细胞E2水平；qRT-PCR检测H19和miR-195-5p水平，Westernblot检测SGK，电镜检测心肌组织自噬体，Westernblot检测LC3I/LC3II和p62表达，CCK8及流式检测细胞凋亡，Transwell和划痕检测细胞迁移侵袭。

3.构建裸鼠皮下EC移植瘤模型，设4组，统计小鼠生存率改变；HE及Massion检测肿瘤组织病理生存期、肿瘤体积重量称重测量统计；放射性免疫法检测小鼠E2水平、qRT-PCR检测H19和miR-195-5p水平，Westernblot检测SGK1、电镜检测心肌组织自噬体，Westernblot检测LC3I/LC3II和p62表达。

（二）费用及完成时限

总费用不超过6万；在2021年12月之前完成并递交研究报告。

二、招标组织形式：

1、拟委托招标机构名称：

（拟由医院年度招标代理机构目录外的招标代理机构招标，需说明理由）

2、自行招标  ?

三、招标方式

1、公开招标  ?

2、邀请招标  □

四、招标计划

1、招标公告（或招标邀请书）发布时间：2020年4月1日

2、开标及评标时间：                2020年 4 月 8 日

五、拟邀请投标人及理由

六、招标评标委员会组成

技术专家  人，名字：

经济专家  人，名字：

七、评标方法、标准及授标原则

采用综合评估法，对技术、商务标评分内容进行评估

（列明采用的评标方法，最低投标价或综合评估法，技术、商务标评分的主要内容及权重，授标原则）

八、需另外说明的事项

无